
移液枪校准日:实验室最被忽视的仪式
主题:实验室日常 | 关联:Labselect 耗材 | 字数:约1100字
每个实验室大概都有一把"祖传"的移液枪。
这话我在好几个实验室都听过。服役八年十年的,枪头松了插上 tip 就漏液,刻度旋钮阻尼忽大忽小,但每个人用完还是放回原位,从来没人提过送它去校准。
你要问起来,回答基本都一样:"还能用啊。"
干我们售后这行的,听到"还能用"三个字就头疼。它基本等于"我也不确定准不准,但凑合着用"。
枪不准,实验真的白做
移液枪大概是实验室里用得最频繁的东西了。一天吸液上百次,配缓冲液、稀释抗体、铺细胞、加样跑 PCR,全靠它。每次吸液其实都在积累误差,只不过你看不见。
吸出来的液体看起来跟昨天没区别,但实际体积可能已经偏了 5%、8% 甚至更多。这个偏差当天发现不了,等你重复实验怎么都复现不出来的时候,才会慢慢意识到不对劲。
说真的,我每年接手的"实验复现不出来"的求助,十有八九最后查下来跟移液器有关。去年有个课题组做 ELISA,标准曲线连续三周画不好,复孔间变异系数飙到 15% 以上。他们换试剂、换操作人、换孵育时间,折腾一圈没解决。送到我们这边一测,那把 P200 弹簧老化,实际吸液量比刻度值少了 12 微升。换了把校准过的枪,曲线立马就漂亮了。
三周时间,三个人的人力,搭在了一把没校准的移液枪上面。这种账算下来真挺亏的。
重量法:自己就能做的校准
校准移液枪不用送专业机构,实验室自己就能搞。最靠谱的方法是重量法。
原理不复杂:水的密度是已知的,室温下大概 0.998 g/mL,用分析天平称一下吸出来的水有多重,反推实际体积就行。
操作也不算麻烦。准备一台万分位天平(精度 0.1 mg 那种)、一管室温平衡过的超纯水、一个小称量杯。
设好量程,润洗 tip 三次。吸液的时候垂直插进液面,别太深,两三毫米够了。匀速慢慢吸,吸完停两秒让液面稳住。然后把液体打到称量杯里,称重。重复个十次,取平均值,算一下实际体积和变异系数。
合格标准我一般这么定:体积误差不超过标称值的 ±2%,变异系数不超过 1%。不同量程会有些区别,大体积允许误差小一些。说实话这个标准不算严,但实验室自检够用了。
整个过程也就半小时的事。半年做一次,基本能保证枪的精度在靠谱范围内。不是我较真,是数据这东西你不盯它,它就敢飘给你看。

日常用枪的几个习惯
校准是出了问题再补救,平时的使用习惯才是根本。这几个习惯保持好的话,枪的精度寿命能长不少。
吸液的时候要垂直。倾斜着吸会偏大,尤其是大体积的枪。养成垂直插液面的习惯,偏差能小一半——这个我们测过,不是瞎说。
换新 tip 之后先吸排两三次再正式用。这叫润洗,让 tip 内壁形成一层液膜。不润洗的话第一次吸液会偏小,因为有一部分液体沾在干壁上了。
千万别拿移液枪当搅拌棒用。去搅溶液很容易让液体倒吸进枪体,腐蚀活塞。活塞一旦生锈,精度就彻底废了,修都修不回来。每年我们送修的枪,三成是这么坏的。
还有一个小习惯,用完枪之后把量程调到最大。这样弹簧是放松的状态,不容易疲劳。坚持半年你就会发现自己那把枪比实验室别人的明显准。

什么时候该送修
重量法校准如果发现偏差超过 5%,怎么调零都拉不回来,那基本是内部零件有问题了。这种情况就别硬调了,送修。
平时用的时候如果感觉阻尼突然变了,或者吸液的时候有气泡,或者排完液 tip 里总剩着一点,这些都是该检修的信号。
移液枪说到底是消耗品,不是传家宝。一把枪用十年不修不校准,这不是省钱,是拿实验的可靠性在赌。我们组这些年见过太多"赌输了"的案例,最后都是数据报废、实验重做。
下次进实验室,花个十分钟给常用的那把枪做一次重量法校准。做完之后你会对自己的数据更有底气。
你们实验室的枪多久校准一次?有没有因为枪不准踩过坑的,留言说说。
撰稿:售后-陈工 | 编辑:Sea | 校对:Peter
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