实验流程

从模型建立到读数验证怎么走?

按步骤核对细胞来源、ECM、培养体系、质控和成像/药筛读数。

细胞来源与模型设计

确认原代样本、干细胞或细胞系来源,定义培养目标、分化方向和验证指标。

核对项

  • 细胞来源和授权信息明确
  • 模型目标和终点指标清晰
  • 阳性/阴性对照已规划
  • 传代和冻存策略已确定

本步产出

  • 模型设计记录
  • 细胞来源和对照清单
  • 初始材料需求

相关产品/工具

细胞系细胞培养试剂
选型决策

类器官项目前先确认什么?

对照模型来源、ECM 批次、培养体系、读数方式和验证路径,形成可复现方案。

1

模型来源如何确定

原代、干细胞和细胞系模型在稳定性、复杂度和可解释性上差异较大。

2

ECM 与培养基如何选择

需结合组织来源、分化方向和批次可获得性,优先建立可追溯记录。

3

读数方式是否匹配模型

厚样本成像、活力检测和药筛读数需考虑穿透深度、背景和中心坏死。

4

是否需要二维验证

关键结果建议结合 2D 细胞、WB、qPCR、IF 或流式做交叉验证。

实验材料准备助手

免疫荧光材料准备

告诉我们样本量、荧光通道和实验阶段,我们为您整理一抗、荧光二抗、核染、封闭通透、抗淬灭封片与成像材料。

实验条件

用于完善材料配置和质控判断;暂不确定时可保留默认设置。

样本类型

通道规划

实验阶段

基础信息

填写模型类型、样本批次和检测目标,用于整理 3D 培养和读数材料。

染色批次

3 批

荧光通道

2 个

染色运行

6 次

对照样本

3 份

材料准备清单

16
  1. 1

    IF 验证一抗(按靶标分别选型)

    2

    按 2 个目标通道估算;优先确认 IF/ICC 或 IF-Fr 应用和阳性图像。

  2. 2

    荧光二抗(488/555/594/647 等)

    2

    需匹配一抗宿主和显微镜通道;多标实验建议交叉吸附二抗。

  3. 3

    DAPI / 核染料

    1

    用于核染和图像配准,注意避光保存和固定稀释比例。

  4. 4

    4% PFA 固定液或甲醇固定试剂

    1

    按抗原特性选择 PFA、甲醇或丙酮固定方式。

  5. 5

    通透液(Triton X-100 / saponin)

    1

    胞内或核内靶点需要通透;膜蛋白需谨慎选择强度。

  6. 6

    封闭液 / 抗体稀释液

    1

    用于降低二抗非特异结合,建议与二抗宿主和样本类型兼容。

  7. 7

    PBS/TBS 洗液

    1

    固定、通透、抗体孵育和核染后均需洗涤;多标实验建议足量准备。

  8. 8

    抗淬灭封片剂

    1

    保护荧光信号;共聚焦或长期保存建议选择抗淬灭版本。

分级选购建议

我该买什么?

选择您的经验阶段与采购目的,查看对应的必买清单与产品建议。

新手类器官与 3D 培养初购组合

适合首次建立实验流程的团队,重点是补齐关键试剂、基础耗材和质量控制材料。

必买

  • ECM/基质胶
  • 低吸附培养板
  • 3D 培养基
  • 生长因子
  • 细胞活力检测试剂

推荐配置

  • Live/Dead 染色
  • 小分子抑制剂
  • 冻存复苏试剂
  • 免疫荧光抗体
  • 透明化和封片试剂

可选升级

  • 药筛读数体系
  • 高内涵成像耗材
  • 批次质控材料

仅供参考,具体品牌与货号请至产品中心选型;不同实验室和样本情况可能有所不同。

疑难协助

类器官培养或读数不稳定?

选择最接近的情况,查看常见原因、核对项和调整建议。

已勾选 0 / 4

模型建立失败

接种后类器官形成率低,结构松散,或短期内大量死亡。

常见原因

  • 细胞状态不佳
  • ECM 批次或浓度不合适
  • 生长因子缺失或失活
  • 接种密度和操作温度不稳定

核对项

调整建议

  • 优化细胞来源和接种密度
  • 比较 ECM 批次或浓度
  • 更换新鲜生长因子
  • 标准化冰上操作和凝胶时间

处理建议

建议保留细胞来源、passage、ECM 批号、培养基配方、接种密度、传代节奏和读数原始数据。

建议优先补齐 ECM、低吸附耗材、生长因子和活力检测材料。

相关产品与资料

常见问题

类器官项目最先确认什么?

先确认细胞来源、模型目标、ECM 类型、培养基组成、生长因子和读数方式。

ECM 批次差异如何控制?

建议记录批号、蛋白浓度、凝胶条件和桥接质控结果,关键项目尽量使用稳定批次。

药筛读数为什么波动大?

常见原因包括类器官大小不均、药物扩散不足、中心坏死、染色穿透不足和图像阈值不一致。