
流式细胞术工作台
分析免疫分型、细胞周期、凋亡、胞内因子和分选前样本。
从样本到 FCS 数据怎么走?
按步骤核对关键项,查看每步产出、站内工具与免费开源分析软件。
做流式前先确认什么?
对照下列决策点缩小抗体、荧光素、对照和样本制备试剂范围,再至产品中心筛选或查看分级选购建议。
荧光光谱与仪器通道
选择常用流式染料,结合预设仪器或手动激光/滤光片配置,快速查看激发、发射光谱与通道兼容性。
荧光光谱查看器
图表加载中...
紫光 (405nm)
绿光 (488nm)
黄绿 (561nm)
红光 (640nm)
远红 (640nm)
流式细胞术材料准备
告诉我们样本量、上机批次和 panel marker 数,我们为您整理抗体、死活染、补偿/FMO、流式管、滤网与样本制备建议。
实验条件
用于判断样本制备、死活染、补偿、胞内染色和分选需求;不确定时保持默认即可。
样本类型
Panel 类型
实验阶段
基础信息
填写样本量与 panel 信息,我们会即时更新流式染色与对照材料建议。
上机批次
3 批
Panel marker
2 个
预计染色管
28 管
对照管
4 管
材料准备清单
共 14 项- 1
流式验证抗体(按 marker 分别选型)
2 支按 2 个 marker 估算;需确认 Flow/FCM 应用、克隆号和荧光素。
- 2
死活染料(Fixable viability dye 或 PI/7-AAD)
1 支用于排除死细胞;固定通透实验需选择 fixable 版本。
- 3
FACS Buffer / 染色缓冲液
1 瓶常用 PBS + BSA/FBS + EDTA;用于染色、洗涤和重悬。
- 4
流式管 / 5 mL 圆底管
1 包按样本、单染补偿和对照共约 28 管估算。
- 5
细胞滤网(40/70 μm)
1 包上机前过滤单细胞悬液,降低聚团和堵针风险。
- 6
补偿微球 / 单染补偿材料
2 份每个荧光通道建议准备单染补偿,复杂 panel 尤其必要。
- 7
FMO / 同型对照材料
1 套用于判断门控边界和非特异背景;关键 marker 优先设置 FMO。
- 8
Fc Block
1 支免疫细胞样本建议加入,降低 Fc 受体介导的非特异结合。
我该买什么?
选择您的经验阶段与采购目的,查看对应的必买清单与产品建议。
新手流式初购组合
适合第一次做流式检测,重点是把表面标志物抗体、死活染、缓冲液、滤网和对照管补齐。
必买
- 流式验证抗体
- 死活染料
- FACS Buffer
- 细胞滤网
- 流式管
推荐配置
- Fc Block
- 单染补偿对照
- 同型对照
- 红细胞裂解液
- 计数板或细胞计数试剂
可选升级
- 预混 panel
- 补偿微球
- Fixable viability dye
仅供参考,具体品牌与货号请至产品中心选型;不同实验室和样本情况可能有所不同。
流式结果不理想?
选择最接近的情况查看参考排查项;如需人工协助,建议保留 panel、补偿和 FCS 信息。
信号弱 / 阳性群不清
阳性群和阴性群分不开,或目标 marker 信号接近背景。
常见原因
- 抗体克隆或荧光素不适合该 marker
- 抗体滴度过低或染色时间不足
- 低表达 marker 分配了较暗染料
- 样本处理导致抗原丢失或细胞状态差
可参考的核对项
还需要查阅什么?
流式指南、免费开源工具与支持入口;选型与材料清单请回到上方工作台模块。
常见问题
流式抗体怎么选?
先确认 Flow/FCM 应用、物种、克隆号和目标细胞类型,再按仪器通道选择荧光素。
什么时候需要 FMO?
多色 panel 中边界不清、连续表达或低丰度 marker 建议设置 FMO,用于确定门控边界。
背景高先查什么?
先看死活染、无染/单染/FMO、Fc Block 和样本碎片聚团,再调整抗体滴度与洗涤。