
分子生物学工作台
提取核酸、完成 PCR/qPCR 与反转录,开展克隆构建和表达验证。
从核酸到验证怎么走?
按步骤核对关键项,查看每步产出与相关产品入口。
样本与核酸提取
按样本类型选择 DNA/RNA/miRNA 提取方案,控制降解、污染和产量波动。
核对项
- 样本来源、保存和冻融次数已记录
- DNA、RNA 或 miRNA 类型已确认
- RNase/DNase-free 操作材料已准备
- 浓度、纯度和完整性检测方式已规划
本步产出
- 可用于扩增的核酸模板
- 浓度与纯度记录
- 提取和纯化材料清单
做分子实验前先确认什么?
对照下列决策点缩小提取、扩增、反转录、克隆和耗材范围,再至产品中心筛选或查看分级选购建议。
分子生物学材料准备
告诉我们样本量、反应批次和靶标/构建数量,我们为您整理核酸提取、PCR/qPCR、反转录、电泳、纯化、克隆和无核酸酶耗材建议。
实验条件
用于判断提取、扩增、反转录、克隆和污染控制需求;不确定时保持默认即可。
模板类型
实验类型
实验阶段
基础信息
填写样本量、反应批次与靶标数量,我们会即时更新核酸实验材料建议。
实验批次
5 批
检测靶标
2 个
基础反应
48 个
总预估反应
67 个
材料准备清单
共 14 项- 1
DNA / PCR 产物提取纯化试剂盒
1 盒按 24 个样本估算;RNA 项目需全程 RNase-free 操作。
- 2
PCR Master Mix / DNA Polymerase
1 套按约 67 个反应估算,已包含对照和 15% 预留。
- 3
引物 / 探针(按靶标或构建分别设计)
2 对/套按 2 个靶标/构建估算;qPCR 建议同时确认扩增效率和熔解曲线。
- 4
Nuclease-free 水
1 瓶PCR/qPCR、反转录、引物稀释和阴性对照均需使用。
- 5
滤芯吸头(10 / 200 / 1000 μL)
1 盒用于降低气溶胶污染;PCR/qPCR 建议固定专区使用。
- 6
PCR 管 / 8 联管 / PCR 板
1 盒需匹配 PCR 仪模块规格。
- 7
琼脂糖、凝胶染料和电泳缓冲液
1 套用于终点 PCR、克隆片段和纯化前后确认。
- 8
DNA 分子量标准 / Ladder
1 支按片段大小选择 100 bp、1 kb 或宽范围 Marker。
我该买什么?
选择您的经验阶段与采购目的,查看对应的必买清单与产品建议。
新手分子生物学初购组合
适合第一次搭建 PCR/qPCR 或基础核酸检测流程的实验室,重点是补齐提取、扩增、电泳和污染控制材料。
必买
- 核酸提取试剂盒
- PCR/qPCR Master Mix
- 引物
- Nuclease-free 水
- 琼脂糖和 DNA Marker
推荐配置
- 反转录试剂
- PCR 管/板
- 滤芯吸头
- 凝胶染料
- PCR 产物纯化试剂盒
可选升级
- 热启动酶
- 高保真酶
- qPCR 专用耗材
仅供参考,具体品牌与货号请至产品中心选型;不同实验室和样本情况可能有所不同。
扩增或构建不顺利?
选择最接近的情况查看参考排查项;如需人工协助,建议保留模板、引物、体系和电泳/qPCR 数据。
PCR 无条带 / 条带弱
电泳后目标片段不可见,或条带明显弱于预期。
常见原因
- 模板质量差或含抑制物
- 引物设计或退火温度不合适
- 酶体系不适合 GC-rich/长片段模板
- 循环数、Mg2+ 或模板量不足
可参考的核对项
调整建议
- 重新纯化模板或稀释抑制物
- 更换热启动或高保真/GC-rich 专用酶
- 优化退火温度和循环数
- 准备阳性对照和新鲜 dNTP/Mix
我们的建议
对照核对项自查后若仍存疑,请保留样本类型、模板质量、引物序列、酶体系、循环条件和代表性结果,便于进一步协助。
推荐从“进阶分子生物学初购组合”开始,重点补高保真酶、模板纯化和对照体系。
相关产品与资料
还需要查阅什么?
PCR/qPCR、克隆、转染指南、免费开源工具与公共数据库;选型与材料清单请回到上方工作台模块。
引物设计
克隆构建
RNA 调控与靶标
常见问题
第一次做 PCR/qPCR 先买什么?
先准备核酸提取、PCR/qPCR Mix、引物、无核酸酶水、PCR 管板、滤芯吸头、电泳和对照材料。
qPCR 重复孔差异大先查什么?
先看加样、板膜密封、气泡、熔解曲线、NTC 和模板质量,再调整引物、反转录和 Mix。
克隆项目如何降低失败率?
优先确认载体图谱、插入片段纯度、连接/组装比例、感受态效率、抗性筛选和测序验证。