免疫荧光染色工作台
观察细胞、冰冻切片和部分 FFPE 样本中的荧光定位。
从样本到荧光图像怎么走？
按步骤核对关键项，查看每步产出、站内光谱工具与免费开源图像分析工具。
做免疫荧光前先确认什么？
对照下列决策点缩小一抗、荧光二抗、染料和封片体系范围，再至产品中心筛选或查看分级选购建议。
免疫荧光材料准备
告诉我们样本量、荧光通道和实验阶段，我们为您整理一抗、荧光二抗、核染、封闭通透、抗淬灭封片与成像材料。
实验条件
用于判断固定、通透、封闭、二抗通道和封片方式；不确定时保持默认即可。
样本类型
通道规划
实验阶段
基础信息
填写样本量与荧光通道，我们会即时更新染色试剂与耗材建议。
染色批次
3 批
荧光通道
2 个
染色运行
6 次
对照样本
3 份
材料准备清单
共 16 项- 1
IF 验证一抗（按靶标分别选型）
2 支按 2 个目标通道估算；优先确认 IF/ICC 或 IF-Fr 应用和阳性图像。
- 2
荧光二抗（488/555/594/647 等）
2 支需匹配一抗宿主和显微镜通道；多标实验建议交叉吸附二抗。
- 3
DAPI / 核染料
1 瓶用于核染和图像配准，注意避光保存和固定稀释比例。
- 4
4% PFA 固定液或甲醇固定试剂
1 瓶按抗原特性选择 PFA、甲醇或丙酮固定方式。
- 5
通透液（Triton X-100 / saponin）
1 瓶胞内或核内靶点需要通透；膜蛋白需谨慎选择强度。
- 6
封闭液 / 抗体稀释液
1 瓶用于降低二抗非特异结合，建议与二抗宿主和样本类型兼容。
- 7
PBS/TBS 洗液
1 套固定、通透、抗体孵育和核染后均需洗涤；多标实验建议足量准备。
- 8
抗淬灭封片剂
1 瓶保护荧光信号；共聚焦或长期保存建议选择抗淬灭版本。
我该买什么？
选择您的经验阶段与采购目的，查看对应的必买清单与产品建议。
新手免疫荧光初购组合
适合第一次做细胞或切片免疫荧光，重点是买齐一抗、荧光二抗、核染、封闭通透和抗淬灭封片材料。
必买
- IF 验证一抗
- 荧光二抗
- DAPI/核染料
- 封闭液
- 抗淬灭封片剂
推荐配置
- 固定液
- 通透液
- PBS/TBS 洗液
- 爬片/防脱载玻片
- 无一抗阴性对照
可选升级
- 交叉吸附荧光二抗
- 预吸附二抗
- 共聚焦适配封片剂
仅供参考，具体品牌与货号请至产品中心选型；不同实验室和样本情况可能有所不同。
荧光图像不理想？
选择最接近的情况查看参考排查项；如需人工协助，建议保留通道设置、曝光参数和原始图。
还需要查阅什么？
免疫荧光指南、免费开源图像工具与支持入口；选型与材料清单请回到上方工作台模块。
常见问题
免疫荧光二抗怎么选？
先看一抗宿主，再匹配显微镜通道；多标实验优先选择交叉吸附二抗并设置单染对照。
DAPI 和目标通道会冲突吗？
DAPI 通常在蓝色通道，需和 488、555/594、647 等目标通道分开采集，避免过曝影响合并图判断。
背景高先改什么？
先做无一抗对照和未染样本，区分二抗背景与自发荧光，再调整封闭、抗体浓度、洗涤和通道选择。