酶联免疫吸附试验（ELISA）操作指南

1实验步骤

1. 1准备工作：将试剂盒恢复至室温（18-25℃），标准品和样品做复孔
2. 2加标准品：设置标准品孔，分别加入倍比稀释的标准品 100μL
3. 3加样品：样品孔加入 100μL 待测样品，空白孔加 100μL 稀释液
4. 4孵育：用封板膜封板，37℃孵育 90 分钟
5. 5洗板：弃液体，每孔加满 Wash Buffer，静置 30 秒，重复 5 次，拍干
6. 6加一抗：每孔加入 100μL 生物素标记抗体工作液，封板，37℃孵育 60 分钟
7. 7洗板：同上步骤
8. 8加酶：每孔加入 100μL HRP 标记亲和素工作液，封板，37℃孵育 30 分钟
9. 9洗板：同上步骤
10. 10显色：每孔加入 100μL TMB 底物溶液，37℃避光孵育 15-30 分钟
11. 11终止：加入 100μL Stop Solution，轻轻混匀
12. 12测定：酶标仪 450nm 波长测定 OD 值，参考波长 570nm